Ｃａｓ９ 단백질을 이용한 고효율 어댑터 연결 반응에서 어댑터 이합체의 제거 방법

기술 요약NGS 라이브러리 제작 과정에서 어댑터끼리 결합하여 발생하는 이합체는 시퀀싱의 정확도와 민감도를 저해하는 주요 원인입니다. 본 기술은 Cas9 단백질과 특이적으로 설계된 gRNA를 결합한 RNP 복합체를 활용하여 어댑터 이합체만을 선택적으로 절단하여 제거합니다. 특히 PEG-6000을 8~10% 농도로 첨가하고 표적 DNA와 어댑터의 몰비를 최적화함으로써 연결 효율을 극대화하는 공정을 확립하였습니다. 이를 통해 기존 정제 방식의 한계를 극복하고 시퀀싱 데이터의 품질을 향상시킬 수 있으며, 정밀 의료 및 액체 생검 등 고감도 분석이 필요한 분야에 효과적으로 적용 가능합니다.